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液相色譜柱常見問題及解決方案

更新時間:2017-02-18      點(diǎn)擊次數(shù):3254

1.液相色譜柱柱壓高    

 壓力單位換算:1bar=0.987大氣壓=14.503psi=0.1MPa=1.0197kg/cm2

 (1)新柱(未進(jìn)過樣品或只進(jìn)過柱效測試標(biāo)樣)壓力高:

 以原廠報(bào)告上*一樣的條件下測試比較,若壓力在報(bào)告壓力值上下浮動200-300psi以內(nèi),可視為正常范圍;若高于出廠報(bào)告壓力值1倍或以上,有以下原因引起:

 1.~99.9%原因:系統(tǒng)壓力高,包括保護(hù)柱,泵,管路和接頭等引起。

 解決方案:從系統(tǒng)上拿掉柱子,逐步檢查具體哪個部件引起的;或者換不同的儀器平衡柱子,比較壓力值,排除柱子本身的問題。注意:必須是平衡柱子達(dá)足夠時間后的穩(wěn)定壓力值。如果您仍然不放心,可先寄回在我們公司實(shí)驗(yàn)室測試。

 2.~0.1%原因:柱子本身壓力高,寄回供應(yīng)方測試,如若核實(shí),可提供相關(guān)更換等處理。

 (2)使用一段時間后的舊柱壓力升高:

HPLC系統(tǒng)原因仍然存在,排除系統(tǒng)原因后,幾乎100%的原因是由于實(shí)驗(yàn)過程中雜質(zhì)在柱中的累積。

 解決方案:盡量完善操作條件,做完樣品后要及時沖洗干凈,如緩沖鹽的流動相一定要用高比例的水溶液(如90%)沖洗*后再用有機(jī)相保存。

 

2.液相色譜柱柱效低    

 (1)新柱(未進(jìn)過樣品或只進(jìn)過柱效測試標(biāo)樣)柱效低:

 以原廠報(bào)告的條件下測試同樣的標(biāo)樣,Supelco,Kromasil以及Agilent等柱子以甲苯作為比較,CNW柱子以萘作為比較,Waters柱子以苊作為比較,根據(jù)儀器不同,如果250*4.6mm,5um柱效在2000左右的差異可以認(rèn)為是符合出廠要求的;如果您的儀器測試結(jié)果相差太大,有以下原因:

 1.~99.9%原因:系統(tǒng)問題,包括接了保護(hù)柱,平衡時間不夠等引起。

 解決方案:取下保護(hù)柱(測試柱效時不能加保護(hù)柱),增加平衡時間,對于新柱,50mm長的柱子平衡時間在30min以上,150mm的柱子在45min以上,250mm長的柱子在75min以上。如果您不放心,可先寄回在我們公司實(shí)驗(yàn)室測試。

 2.~0.1%原因:柱子本身柱效低,寄回公司檢測,如果核實(shí),可提供相關(guān)更換處理,

 (2)使用一段時間后的舊柱柱效降低:

 排除系統(tǒng)原因,基本是測試的條件和樣品導(dǎo)致,如測試條件的pH值在柱子耐受pH值范圍以外,導(dǎo)致柱子內(nèi)填料的溶解或鍵和相流失,此外,樣品前處理不好也會使柱子很快損壞。

 

 3.液相色譜柱峰前延、拖尾等峰形不好    

 (1)柱效測試標(biāo)樣峰形差:基本原因都是平衡時間不夠引起,建議您平衡時間需達(dá)到*部分我們推薦的時間。此外,還有系統(tǒng)原因,可建議您換一臺再測試或寄回測試。

 (2)樣品峰形差:如果柱效測試峰形很好,但是測試樣品峰形差,排除平衡時間等問題后,基本是由于樣品性質(zhì)所引起,如一些堿性樣品會有拖尾現(xiàn)象,但是降低流動相pH值會有改善。

 

4. 液相色譜柱壽命短    

 根據(jù)不同系列的柱子或不同的測試條件,壽命長短各有不同。建議您選擇性能穩(wěn)定、質(zhì)量有保證的品牌。

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